Desarrollan inmunoanálisis enzimáticos para serodiagnóstico de leptospirosis humana

La laboriosa prueba de aglutinación microscópica (MAT) es la prueba serológica estándar de oro actual para el diagnóstico de laboratorio de la leptospirosis. Sin embargo, no se puede utilizar para la identificación inmediata de casos porque es insensible en la infección temprana y solo se puede realizar en laboratorios especializados con personal altamente capacitado y condiciones específicas como colecciones de referencia de serovares vivos de Leptospira, microscopía de campo oscuro, entre otros. Por lo tanto, rara vez lo realizan los laboratorios de diagnóstico clínico.

Científicos médicos del Centro de Ciencias de la Salud de la Universidad de Tennessee (Memphis, TN, EUA) y sus colegas internacionales, recolectaron un panel de 50 muestras de suero humano de personas con fiebre y leptospirosis confirmada por laboratorio (título MAT+ > 1:100) entre 2010 y 2012 en las provincias de Angola y un panel de 50 muestras de suero humano de individuos con fiebre y leptospirosis confirmada por laboratorio (título MAT+ > 1:100). De las Azores, Portugal, recolectaron un panel de 100 muestras de suero humano de individuos con síntomas clínicos (fiebre, mialgia) y leptospirosis confirmada por laboratorio (título MAT+ > 1:100), y un panel de 43 muestras de suero humano de individuos con síntomas clínicos (fiebre, mialgia) y leptospirosis confirmada por laboratorio (título MAT+ > 1:100). Adicionalmente adquirieron un panel de 43 muestras de suero humano de individuos sanos de un área no endémica para leptospirosis de EUA en 2018.

Los científicos desarrollaron ensayos serológicos basados ​​en EIA utilizando proteínas recombinantes (rLigA, rLigB, rLipL32) y extractos de células completas de ocho serovares de Leptospira como antígeno y evaluaron el desempeño diagnóstico del nuevo ensayo dentro de cada clase, frente a paneles de sueros humanos positivos para MAT (MAT+). La OD450 se leyó en un lector EIA SpectraMax Plus (Molecular Devices, San José, CA, EUA). Este ensayo identificó correctamente la IgG específica de antígeno de pacientes con leptospirosis clínica y confirmada por laboratorio (MAT+) con una sensibilidad del 92 % y una especificidad de ~97 %. También informaron que el suero MAT+ IgG+ de Angola tenía una presencia significativamente mayor de IgD y que los isotipos IgG3/IgG1 estaban significativamente aumentados en el suero MAT+ IgG+ de Portugal. Dado que la clase IgM/IgD y los isotipos específicos de IgG3/IgG1 se producen en el curso más temprano de la infección, la isotipificación de inmunoglobulina G se puede usar para informar el diagnóstico de leptospirosis aguda.

Los autores concluyeron que en áreas donde las serovariedades circulantes de Leptospira patógena están bien definidas, se deben explorar ensayos exactos como el EIA que se pueden operar a una fracción del costo de las MAT como herramientas efectivas de serodiagnóstico para la leptospirosis aplicable a humanos y animales. La adición de isotipos IgG3/IgG1 aumenta aún más la probabilidad de que las muestras analizadas representen leptospirosis humana aguda. El estudio fue publicado el 23 de febrero de 2022 en la revista PLOS Neglected Tropical Diseases.