Método molecular evalúa riesgo genético para enfermedad celíaca

Los científicos de la Universidad de Malmö (Malmö, Suecia), desarrollaron un método de PCR semiautomatizado, con cebador de secuencia específica para el antígeno leucocitario humano (HLA) clínico, y se compararon los resultados de la prueba, con los de un método comercial. Se incluyeron los cebadores para cada grupo de alelos, DQA1 y DQB1, en la reacción de PCR-SSP para permitir la diferenciación de los homocigotos de los portadores heterocigotos de alelos de riesgo. Los cebadores para detectar los alelos DRB1 estrechamente vinculados fueron incluidos para resolver los resultados potencialmente ambiguos.

Los productos de PCR, marcados con fluorescencia, de 119 muestras clínicas fueron analizados por electroforesis capilar, y los resultados fueron comparados con aquellos obtenidos previamente con el ensayo DELFIA de Predisposición Genética para la Diabetes tipo 1 (PerkinElmer, Waltham, MA, EUA). La evaluación del riesgo derivada de los dos métodos fue 100% concordante. Se detectó un haplotipo previamente no reportado y las asignaciones de haplotipos en dos de las 119 muestras se mejoraron con respecto a informes anteriores.

Los autores concluyeron que el uso de tres reacciones de PCR y un solo paso electroforético es un método de tipificación de HLA de alto rendimiento que diferencia con exactitud los alelos de riesgo para la EC, a la vez que ofrecen una resolución igual o mejor que muchos kits comerciales disponibles. Este método es, por tanto, muy adecuado para uso clínico con el fin de negar la posibilidad de EC. Aunque la presencia de un alelo de riesgo conocido carece de especificidad para la EC, la ausencia de todos los alelos de riesgo conocidos tiene un alto valor predictivo negativo, obviando así la necesidad de realizar pruebas diagnósticas adicionales. El estudio fue publicado en línea el 8 de enero de 2011, en la revista Clinica Chimica Acta.

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Malmö University
PerkinElmer