Desarrollan inmunoensayos en orina para la leishmaniasis visceral

 

La leishmaniasis dérmica post-kala-azar (PKDL, por sus siglas en inglés) es un reservorio potencial para la diseminación de la LV y se utiliza el examen parasitológico del frotis de hendidura de la piel, junto con los síntomas clínicos, de rutina, para el diagnóstico de la PKDL. Por lo tanto, una prueba no invasiva que tenga una sensibilidad y competencia aceptables, además, de decidir sobre la curación, sería un activo en el manejo y control de la enfermedad.

 

Los especialistas en enfermedades infecciosas del Instituto Indio de Biología Química (Kolkata, India), registraron 186 participantes, entre marzo de 2011 y julio de 2016. Se obtuvieron las muestras de orina de 97 casos demostrados parasitológicamente y por rK39-RDT (InBios International Inc, Seattle, WA, EUA)  de casos de LV, antes de comenzar el tratamiento. De las 97 muestras de LV, 18 fueron tomadas para el estudio longitudinal en diferentes puntos temporales. También se recogieron muestras de 75 individuos control y se recogieron 14 muestras de orina, que fueron confirmadas mediante biopsia de piel o frotis de piel en hendidura, de los pacientes con PKDL.

 

El equipo también realizó análisis de inmunoabsorción enzimática (ELISA) y las densidades ópticas se leyeron a 492 nm. Los científicos también llevaron a cabo ensayos de inmunotransferencia de puntos y prepararon una tira reactiva de membrana de nitrocelulosa para realizar una prueba y una línea de control para la detección visual de la enfermedad. Al igual que los ensayos de inmunotransferencia, la prueba de la tira reactiva comprende la incubación con una muestra de orina seguida por la adición de una inmunoglobulina G (IgG) anti-humana, conjugada con enzima y luego el cromógeno del sustrato, incluyendo el lavado en cada paso. Las bandas de color marrón oscuro tanto en la línea de ensayo como en la de control muestran positividad para la LV y una única banda en la línea de control infiere negatividad para la LV.

 

El equipo encontró que tanto el ELISA como la prueba de tira reactiva, eran extremadamente eficaces para el diagnóstico de la LV y la PKDL, usando muestras de orina y, de esta manera, se podría sustituir el diagnóstico invasivo que se usa hoy en día. La utilidad de estas pruebas como métodos indirectos de control de la eliminación del parásito puede definir a los infectados frente a los curados. La prueba de la tira reactiva en orina es un método simple, sensible y, sobre todo, no invasivo, que puede ayudar no sólo en la detección activa de los casos de LV, sino también para determinar la respuesta al tratamiento. Por lo tanto, se puede utilizar ampliamente para las intervenciones en el manejo de LV, especialmente en los escenarios de recursos pobres. El estudio fue publicado el 14 de octubre de 2016, en la revista Public Library of Science Neglected
tropical Diseases.

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