Método basado en lágrimas detecta cáncer de mama

Con el avance continuo en las técnicas de identificación de biomarcadores, existe un interés creciente en encontrar marcadores de enfermedades en fluidos biológicos no tradicionales. Se han identificado biomarcadores asociados al cáncer de mama en orina, aspirado de líquido del pezón y leche materna. El fluido lagrimal es uno de los biofluidos más subestimados que ha ido ganando interés en los últimos años.

Los científicos de Namida Lab Inc (Fayetteville, AR, EUA) y sus colegas médicos, examinaron el proteoma ocular para identificar biomarcadores de proteínas con niveles de expresión alterados en mujeres diagnosticadas con cáncer de mama. Recolectaron muestras de lágrimas de 273 participantes utilizando métodos de recolección de tiras de Schirmer.

Después de la elución de la proteína, se utilizó la digestión con tripsina de todo el proteoma mediante cromatografía líquida/espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS) para identificar posibles biomarcadores de proteínas con niveles de expresión alterados en pacientes con cáncer de mama. Análisis MS/MS mediante disociación inducida por colisión en un espectrómetro de masas LTQ Orbitrap Velos (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA). Los datos de MS se adquirieron usando el analizador FTMS en modo de perfil a una resolución de 60.000 en un rango de 375 a 1.500 m/z. Los biomarcadores seleccionados se validaron adicionalmente mediante un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA). Se usaron procedimientos ELISA tipo sándwich estándar con kits DuoSets ELISA (R&D Systems, Minneapolis, MN, EUA) para evaluar el nivel de expresión de S100A8 (SA8), S100A9 (SA9) y la proteína de unión a galectina-3 (LG3BP) en muestras de lágrimas

Los investigadores informaron que se analizaron un total de 102 muestras individuales de lágrimas (51 de cáncer de mama, 51 de control) mediante LC-MS/MS que permitieron la identificación de 301 proteínas. Se compararon las intensidades espectrales entre los grupos y se identificaron 14 proteínas significativas como biomarcadores potenciales en pacientes con cáncer de mama. Se seleccionaron tres biomarcadores, S100A8 (aumento de 7,8 veces), S100A9 (aumento de 10,2 veces) y proteína de unión a galectina-3 (aumento de 3,0 veces) con una mayor expresión en pacientes con cáncer de mama para validación mediante ELISA.

La validación por ELISA se realizó utilizando 171 muestras de lágrimas individuales (75 de cáncer de mama y 96 de control). Similar a los resultados observados con la LC-MS/MS, S100A8 y S100A9 mostraron una expresión significativamente mayor en pacientes con cáncer de mama. Sin embargo, la proteína de unión a galectina-3 tenía una expresión superior en el grupo de control.

Los autores concluyeron que sus resultados brindaron más apoyo para usar proteínas lagrimales para detectar enfermedades sistémicas no oculares, como el cáncer de mama. El trabajo proporcionó detalles cruciales para respaldar la evaluación continua de muestras de lágrimas en la detección y el diagnóstico del cáncer de mama y allana el camino para la evaluación futura del proteoma lagrimal para la detección y el diagnóstico de enfermedades sistémicas. El estudio fue publicado el 26 de abril de 2022 en la revista PLOS ONE .